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Title of Journal: Urologe

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Abbravation: Der Urologe

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Publisher

Springer-Verlag

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ISSN

1433-0563

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Immunstimulative CpGOligodeoxynukleotide CpGODN

Authors: PJ Olbert AJ Schrader R Hofmann A Hegele
Publish Date: 2008/08/06
Volume: 47, Issue: 9, Pages: 1133-1136
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Abstract

CpGOligodeoxynucleotides CpGODN sind potente Stimulatoren der angeborenen Immunität sie fördern die Ausprägung einer Th1gewichteten Immunantwort mit antineoplastischem Potential Wir konnten vor kurzem den antineoplastischen Effekt in murinen TCCModellen nachweisen Ziel der vorliegenden Arbeit war es den immunologischen Wirkmechanismus hinter diesem Effekt besser kennen zu lernenEin TCC aus MB49Zellen wurde durch intravesikale Instillation am Tag 0 in 6 weiblichen C57/Bl6Mäusen pro Gruppe etabliert Hieran schloss sich eine mehrfache Instillation mit einem immunstimulativen CpGODN mit einer GpCKontrollsequenz oder mit PBS an 6 native Blasen dienten als Negativkontrolle Die Mäuse wurden am Tag 11 getötet und die Blasen nach Entnahme für die quantitative RTPCR aufgearbeitet Diese wurde für IL12 IFNγ IL10 und TGFβ durchgeführt βAktin diente als HousekeepingGenDie Zytokinexpression war in den Gruppen 1 und 4 vergleichbar Alle gemessen Zytokine waren in den Gruppen 2 und 3 überexprimiert ohne dass sich zwischen diesen beiden Gruppen ein relevanter Unterschied gezeigt hätte Die CpGODN bewirken im gewählten Modell eine Überexpression sowohl von Th1 als auch von Th2ZytokinenCpGoligodeoxynucleotides CpGODN are potent stimulators of the innate immune system They promote a Th1biased immune response with antineoplastic potential We recently demonstrated antitumoral effects of CpGODN in murine transitional cell carcinoma TCC models The purpose of the present work was to more precisely define the immunological nature of this immunotherapeutic approach to TCCMB49 TCC was established in female C57/Bl6 mice by intravesical tumor cell instillation after polyLlysine conditioning of the bladder day 0 as described previously Three groups of six mice were treated intravesical instillation of 50 µl PBS on days 1 3 5 and 7 group 1 untreated control 10 nmol CpG 1668 on days 1 3 5 and 7 group 2 and 10 nmol GpC 1668 on days 1 3 5 and 7 group 3 Six native bladders served as notreatment/notumor controls group 4 Mice were sacrificed on day 11 bladders and draining lymph nodes were removed and mRNA was prepared for quantitative realtime polymerase chain reaction Samples were analyzed on a BioRad iCycler for IL 10 TGFß IL 12 and IFNγ expression threshold values were compared to ßactin as housekeeping geneTumor take was 100 Three animals in group 1 had to be sacrificed in advance due to rapid tumor progression Relative cytokine expression was comparable in groups 1 and 4 IL10 IL12 TGFß and IFNγ were overexpressed in groups 2 and 3 CpGODN treatment of murine TCC results in overexpression of both classic Th1 cytokines IL 12 and IFNγ and the Th2 marker IL 10 TGFß expression is increased as well These phenomena are not induced by the growing TCC but by CpGODN therapy They are accompanied by an objective clinical response as we were able to show recently Immunostimulatory DNA holds promise to be a novel therapeutic agent in TCC


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